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定義：采用聚合酶鏈反應(yīng)等手段在體外獲得成套抗體可變區(qū)輕重鏈基因，將這些基因重組入一定的載體，轉(zhuǎn)入適當(dāng)?shù)氖荏w細(xì)胞或噬菌體中，這些抗體基因克隆的集合體。從該文庫中能夠表達(dá)和篩選出所需的單克隆抗體。

學(xué)科：生物化學(xué)與分子生物學(xué)_方法與技術(shù)

相關(guān)名詞：基因工程抗體 人源化抗體 噬菌體展示

圖片來源：視覺中國(guó)

【延伸閱讀】

單克隆抗體自1975年問世以來，在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)、腫瘤的導(dǎo)向治療和放射免疫顯像技術(shù)等領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用，但利用鼠源淋巴細(xì)胞雜交瘤制備的單克隆抗體用于人體，很容易被人類的免疫系統(tǒng)識(shí)別，不但產(chǎn)生人抗鼠抗體，使得抗體療效減弱，還可能引起過敏反應(yīng)?；蚬こ炭贵w是在深入了解抗體基因結(jié)構(gòu)和功能的基礎(chǔ)上，根據(jù)研究者的目的，利用DNA（脫氧核糖核酸）重組技術(shù)，在基因水平設(shè)計(jì)生產(chǎn)出新型的抗體。其中全人源抗體具有高親和力、高特異性以及毒副作用小的優(yōu)點(diǎn)，在全球單抗市場(chǎng)中所占的比重越來越大。

通過重組抗體文庫突變與篩選獲得全人化抗體過程如下：首先是通過克隆多樣化連接的抗體基因，構(gòu)建抗體基因文庫。然后，應(yīng)用不同的展示技術(shù)，表達(dá)抗體基因，將抗體的基因型和表型偶聯(lián)。接下來是通過抗原作用，施加選擇壓力，挑選合適的抗體。最后，擴(kuò)增篩選出來的抗體，將獲得的抗體基因進(jìn)行突變處理，用于新一輪的篩選，如此循環(huán)，直至獲得滿意的抗體。

目前抗體文庫篩選技術(shù)包括噬菌體展示、核糖體和信使核糖核酸展示、微生物細(xì)胞展示、逆轉(zhuǎn)錄病毒展示、慢病毒展示、淋巴細(xì)胞展示和體外區(qū)域化的微珠展示等。噬菌體展示是將抗體片段的編碼基因融合噬菌體的一個(gè)胞膜蛋白基因克隆進(jìn)入噬菌體載體中，使抗體片段展示于噬菌體表面的技術(shù)，是用于抗體文庫展示和篩選使用最廣泛的方法。目前，以上展示技術(shù)還不能廣泛地應(yīng)用于完整免疫球蛋白G抗體的展示，需要首先片段化展示后重建完整抗體分子。一輪文庫抗體展示篩選往往會(huì)因?yàn)榉翘禺愋缘慕Y(jié)合或親和力低下等原因，不能得到適合于診斷或治療的滿意分子。為了得到高親和力的人源化抗體分子，需要進(jìn)行位點(diǎn)突變和篩選，從而改善抗體的結(jié)合特性。

高質(zhì)量的抗體文庫，是篩選出高親和力、高特異性抗體的保證，庫容和多樣性是衡量抗體庫優(yōu)劣的重要指標(biāo)，特別是天然抗體庫，理論上庫容越大，多樣性越高，越容易篩選到高親和力的抗體。

（延伸閱讀作者：東北師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 宋成程博士）

責(zé)任編輯：張兆都