thin-layer chromatography；TLC

定義：將固定相與支持物制作成薄板或薄片，流動相流經(jīng)該薄層固定相而將樣品分離的層析系統(tǒng)。其特點是樣品用量少，分析快速。按所用固定相材料不同，有吸附、分配、離子交換、凝膠過濾等薄層層析方法。

學科：生物化學與分子生物學_方法與技術(shù)_分離純化技術(shù)_層析技術(shù)

相關(guān)名詞：固定相 流動相 分離技術(shù) 顯色劑

圖片來源：視覺中國

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薄層層析是以涂布于載體上的基質(zhì)為固定相，以液體為流動相，對混合樣品進行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)，常用于鑒定小分子物質(zhì)和制備少量樣品，如生物堿、氨基酸、單糖及其衍生物等。根據(jù)固定相的種類可分為吸附薄層層析、分配薄層層析和離子交換薄層層析等。

薄層層析操作方法一般為：薄板制備、點樣、展層、顯色和結(jié)果分析。薄板制備是將吸附劑和黏合劑按一定比例混合，加入適量水調(diào)勻，用涂布器將勻漿緩慢移過基底板，放置晾干，烘烤活化后即可使用。市面上有很多制好的薄層板，可直接使用。點樣是用點樣器將樣品點樣于薄層板上，點樣點須保持在一條與底邊平行的直線上，距底邊≥1.5厘米。點樣原點小而圓，直徑≤2毫米，兩點間隔≥1.5厘米。點樣時務必注意不要損傷薄層表面。點樣結(jié)束后，用電吹風吹干薄板。展層是將點好樣的薄層板放入預先飽和的展層裝置內(nèi)，讓點樣一端進入展層劑中，其深度約0.5厘米。當展層劑上升至離薄層板另一端0.5至1厘米時停止展層，去除薄層板，用電吹風迅速吹干。顯色和結(jié)果分析是將薄層板浸泡于顯色劑中，有些薄層可采用噴霧法或紫外燈/熒光燈照射法顯色，根據(jù)顯色劑顯出的斑點進行結(jié)果分析。

薄層層析具有以下優(yōu)點：

1.展層時間短，分離混合物一般僅需15至60分鐘；

2.設備簡單、操作方便；

3.靈敏度高；

4.溫度變化和溶劑飽和度對Rf值影響較??；

5.可使用腐蝕性顯色劑。

責任編輯：張鵬輝